小液流法測定植物組織水勢
植物組織與外液接觸時發(fā)生水分交換時，若植物組織的水勢等于外液的滲透勢，則 ψ植物=ψS。
一、 原理
將植物組織分別放在一系列濃度遞增的溶液中，當(dāng)找到某一濃度的溶液與植物組織之間水分保持動態(tài)平衡時，則可認為此植物組織的水勢等于該溶液的水勢。因溶液的濃度是已知的，可以根據(jù)公式算出其滲透壓，取其負值，為溶液的滲透勢(ψπ)，即代表植物的水勢(ψw)(waterpotential)。
ψw=ψπ=-P=-CRT(大氣壓)
(一)材料：小白菜、菠菜、油菜或其它作物葉片
(二)儀器設(shè)備：1.帶塞青霉素小瓶12個;2.帶有橡皮管的注射針頭;3.鑷子;4.打孔器5.培養(yǎng)皿。
(三)試劑：1.0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol/L蔗糖溶液;2.甲烯藍粉末。
三、實驗步驟
(一)取干燥潔凈的青霉素瓶6個為甲組，各瓶中分別加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液約4ml(約為青霉素瓶的2/3處)，另取6個干燥潔凈的青霉素瓶為乙組，各瓶中分別加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液1ml和微量甲烯藍粉末著色，上述各瓶加標(biāo)簽注明濃度。
(二)取待測樣品的功能葉數(shù)片，用打孔器打取小圓片約50片，放至培養(yǎng)皿中，混合均勻。用鑷子分別夾入5～8個小圓片到盛有不同濃度的甲烯藍蔗糖溶液的青霉素瓶中(乙組)。蓋上瓶塞，并使葉圓片全部浸沒于溶液中。放置約30～60min，為加速水分平衡，應(yīng)經(jīng)常搖動小瓶。
(三)經(jīng)一定時間后，用注射針頭吸取乙組各瓶藍色糖液少許，將針頭插入對應(yīng)濃度甲組青霉素瓶溶液中部，小心地放出少量液流，觀察藍色液流的升降動向。(每次測定均要用待測濃度的甲烯藍蔗糖溶液清洗幾次注射針頭)。如此方法檢查各瓶中液流的升降動向。若液流上升，說明浸過小圓片的蔗糖溶液濃度變小(即植物組織失水);表明葉片組織的水勢高于該濃度糖溶液的滲透勢;如果藍色液流下降則說明葉片組織的水勢低于該糖溶液的滲透勢，若藍色液流靜止不動，則說明葉片組織的水勢等于該糖溶液的滲透勢，此糖溶液的濃度即為葉片組織的等滲濃度
四、結(jié)果計算
將求得的等滲濃度值代入如下公式：
ψw=ψπ=-CRTi×1.013×0.1。式中：ψw=植物組織的水勢(單位：Mpa)ψπ=溶液的滲透勢C=等滲濃度(mol/L)R=氣體常數(shù)(0.008314MPa/L/mol/K)T=絕對溫度i=解離系數(shù)(蔗糖=1，CaCl2=2.60)1大氣壓=1.013=0.1MPa。
【注意事項】
1.1所取材料在植株上的部位要一致，打取葉圓片要避開主脈和傷口。
2.2取材以及打取葉圓片的過程操作要迅速，以免失水。
3.3帶有結(jié)晶水的甲烯藍不易溶于CaCl2溶液，可在100℃下烘干成無水甲烯藍粉末使用。
