本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1—2009給出的規(guī)則起草。

　　請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及ZL。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些ZL的責(zé)任。

　　本標(biāo)準(zhǔn)由山東省市場監(jiān)督管理局提出、歸口并組織實(shí)施。

　　本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：山東省產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、山東眾合天成檢驗(yàn)有限公司。

　　本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：侯廣月、周莉莉、杜營、楊帆、卞英芳、王一村、劉麗潔、李大為、許士明、汪英英、劉金霞、徐正、武笑穎、李娜、劉忠強(qiáng)、曹世源、鄒惠玲、蘇本玉、李倩。

　　化妝品中2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇的測定

　　高效液相色譜法

　　1

　　范圍

　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化妝品中2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇的高效液相色譜測定方法。

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于液態(tài)、半固態(tài)等乳霜類和部分膏霜類化妝品中2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇的測定。

　　本標(biāo)準(zhǔn)的方法檢出限為0.01 g/kg，定量限為0.03 g/kg。

　　2

　　規(guī)范性引用文件

　　下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

　　GB/T 6682

　　分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

　　3

　　原理

　　用甲醇水溶液提取試樣中的2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇，用配有紫外或二極管陣列檢測器的高效液相色譜儀測定，以色譜峰的保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

　　4

　　試劑和材料

　　除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。

　　4.1

　　試劑

　　4.1.1

　　甲醇：色譜純。

　　4.1.2

　　乙酸銨。

　　4.1.3

　　正己烷：色譜純。

　　4.1.4

　　氯化鈉。

　　4.2

　　試劑配制

　　4.2.1

　　乙酸銨溶液（0.02 mol/L）：稱取1.54 g乙酸銨，加入適量水溶解，用水定容至1 000 mL，經(jīng)0.22 μm水相微孔濾膜過濾后備用。

　　4.2.2

　　甲醇水溶液（84 %，體積比）：量取84 mL甲醇，加水16 mL，充分混勻。

　　4.2.3

　　水飽和正己烷：取200 mL正己烷于250 mL分液漏斗中，加入少量水，劇烈振蕩，靜置分層后，棄去下層水層即得。

　　4.3

　　標(biāo)準(zhǔn)品

　　2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇（CAS號(hào)：52-51-7），純度不低于99.0 %。

　　4.4

　　標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

　　4.4.1

　　2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1.0 mg/mL）：準(zhǔn)確稱取0.025 g（精確至0.1 mg）2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇（4.1.1）溶解并定容至25 mL，配制成濃度為1.0 mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，2 ℃～8 ℃冷藏保存，有效期3個(gè)月。

　　4.4.2

　　2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：將2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（4.4.1）用甲醇水溶液 （4.2.2）依次稀釋成0.4 μg/mL、1.0 μg/mL、2.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、20.0 μg/mL、50.0 μg/mL、100.0 μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。使用前配制。

　　4.5

　　材料

　　4.5.1

　　有機(jī)相微孔濾膜：0.22 μm。

　　4.5.2

　　塑料離心管：50 mL。

　　5

　　儀器和設(shè)備

　　5.1

　　高效液相色譜儀：配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器。

　　5.2

　　分析天平：感量分別為 0.1 mg 和 0.01 g。

　　5.3

　　超聲波清洗器。

　　5.4

　　渦旋混合器。

　　5.5

　　離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于6 000 r/min。

　　5.6

　　分液漏斗：250 mL。

　　6

　　分析步驟

　　6.1

　　試樣提取

　　6.1.1

　　液態(tài)化妝品

　　稱取試樣1.0 g（精確至0.1 mg），置于50 mL具塞離心管中，準(zhǔn)確加入25.00 mL甲醇水溶液（4.2.2），渦旋混合均勻，超聲提取25 min，6 000 r/min 離心5 min，取上清液經(jīng)有機(jī)相微孔濾膜（4.5.1）過濾后上機(jī)測定。

　　6.1.2

　　乳類、膏霜類化妝品

　　稱取試樣1.0 g（精確至0.1 mg）和2 g氯化鈉，置于50 mL具塞離心管中，準(zhǔn)確加入25.00 mL甲醇水溶液（4.2.2），渦旋混合均勻，超聲提取25 min，6 000 r/min 離心5 min，取上清液經(jīng)有機(jī)相微孔濾膜（4.5.1）過濾后上機(jī)測定；若離心后上清液仍渾濁，以6.1.3進(jìn)行試樣提取。

　　6.1.3

　　部分膏霜類化妝品

　　稱取試樣1.0 g（精確至0.1 mg）和2 g氯化鈉，置于50 mL具塞離心管中，準(zhǔn)確加入25.00 mL甲醇水溶液（4.2.2），渦旋混合均勻，超聲提取25 min。加入10 mL水飽和的正己烷（4.2.3），渦旋，離心，用吸管將上層正己烷絮凝狀固體仔細(xì)吸凈棄去。在下層溶液中再加入10 mL水飽和的正己烷（4.2.3），渦旋，離心，棄去上層正己烷。6 000 r/min 離心5 min，取上清液經(jīng)有機(jī)相微孔濾膜（4.5.1）過濾后上機(jī)測定。

　　6.2

　　儀器參考條件

　　6.2.1

　　色譜柱：T3柱，250 mm×4.6 mm(i.d.)，5 μm，或性能相當(dāng)者。

　　6.2.2

　　流動(dòng)相：甲醇+0.02 mol/L乙酸銨溶液=30+70（體積比）。

　　6.2.3

　　流速：1.0 mL/min。

　　6.2.4

　　柱溫：35 ℃。

　　6.2.5

　　進(jìn)樣體積：10 μL。

　　6.2.6

　　檢測波長：二極管陣列檢測器掃描波長設(shè)為200 nm～500 nm，紫外檢測器設(shè)為230 nm。

　　6.3

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

　　將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（4.4.2）按色譜條件（6.2）進(jìn)行測定，以標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的典型色譜圖參見附錄A。

　　6.4

　　試樣溶液的測定

　　將試樣溶液（6.1）按色譜條件（6.2）進(jìn)行測定，外標(biāo)法定量。試樣溶液中被測物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)，超出線性范圍則應(yīng)使用流動(dòng)相（6.2.2）稀釋后再進(jìn)行分析。

　　7分析結(jié)果的表述

　　試樣中2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇的含量按式（1）計(jì)算：

　　式中：

　　X ——試樣中2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇的含量，單位為克每千克（g/kg）；

　　c ——由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；

　　V ——試樣提取溶液的體積，單位為毫升（mL）；

　　n ——試樣的稀釋倍數(shù)；

　　m ——試樣質(zhì)量，單位為克（g）；

　　1000——由mg/kg轉(zhuǎn)換為g/kg的換算因子。

　　以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留3位有效數(shù)字。

　　8 精密度

　　在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10 %。

　　文章鏈接：儀器設(shè)備網(wǎng) https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-2177.html