要使平板菌落計數準確,需要掌握哪幾個關鍵
一、平板劃線分離法 由接種環(huán)以菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線,微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少,并逐步分散開來,如果劃線適宜的話,微生物能一一分散,經培養(yǎng)后,可在平板表面得到單菌落。 二、稀釋倒平板法 先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋(如 一 ∶ 一0 、 一 ∶ 一00 、 一 ∶ 一000 、 一 ∶ 一0000 …),然后分別取不同稀釋液少許,與已溶化并冷卻至 四5 ℃左右的瓊脂培養(yǎng)基混合,搖勻后,傾入滅過菌的培養(yǎng)皿中,待瓊脂凝固后,制成可能含菌的瓊脂平板,保溫培養(yǎng)一定時間即可出出菌落。如果稀釋得當,在平板表面或瓊脂培養(yǎng)基中就可出現分散的單個菌落,這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨后挑取該單個菌落,或重復以上操作數次,便可得到純培養(yǎng)。 稀釋涂布法: 優(yōu)點:可以計數,可以觀察菌落特征。 缺點:吸收量較少,較麻煩,平板不干燥效果不好,容易蔓延。 一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計數??! 稀釋混合平板法: 優(yōu)點:可以計數,吸收量為一ml,較方便。 優(yōu)點:不能觀察菌落特征。 一般用于菌落總數的計數??! 平板劃線法: 優(yōu)點:可以觀察菌落特征,對混合菌進行分離?。∪秉c:不能計
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