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為了證明 Opentrons Flex 高通量 NGS 工作站的有效性，我們成功實現(xiàn)了兩種常用 DNA 文庫制備試劑盒的自動化操作，通過兩種主流文庫制備方案（機械剪切法 vs 酶切片段化法）驗證了96樣本全自動化處理能力。

圖 1. 使用 IDT xGen MC Library Preparation Kit 和 Twist Library Preparation Enzymatic Fragmentation Kit 2.0，在 Opentrons Flex 高通量 NGS 工作站上自動化處理 96 個樣本的文庫制備平臺布局

A 行：(A1) 搭載樣本板的 On-Deck PCR 模塊；(A2–A3) 吸頭盒；(A4) 配備吸頭盒的 Flex 耗材堆棧模塊

B 行：(B2) 廢液槽；(B3) 試劑板 2；(B4) 配備吸頭盒的 Flex 耗材堆棧模塊

C 行：(C1) 搭載試劑板 1 的溫控模塊；(C2) 試劑儲液槽；(C3) 板蓋；(C4) 擴展板位，放置最終樣本板

D 行：(D1) 吸頭盒；(D2) 純化板 1；(D3) 外置垃圾槽擴展模塊；(D4) 擴展板位，放置純化板 2

表1. MiSeq測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評估結(jié)果

本表匯總了基于Illumina MiSeq平臺（2 × 150 測序模式）的測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評估結(jié)果。檢測樣本包含采用IDT xGen MC 試劑盒制備的 Lambda 樣本和使用 Twist EF 2.0 試劑盒制備的人類基因組樣本。主要質(zhì)量指標包括：GC 含量、PF%（Percent Passing Filter）、Q30 值（Quality >30的百分比）及 比對率（Percent Mapped）。

圖 2. IDT xGen MC Library Preparation Kit

(A)  樣本板布局

(B)  文庫片段大小，使用 2% E-Gel 電泳檢測，配有 E-Gel DNA Ladder

(C)  文庫產(chǎn)量對比，F(xiàn)lex 自動化平臺與手動操作結(jié)果比較

圖 3. Twist Library Preparation Enzymatic Fragmentation Kit 2.0

(A)  樣本板布局，G 行與 H 行采用棋盤格（Checkerboard）模式進行測試

(B)  文庫片段大小，使用 2% E-Gel 電泳分析，配有 E-Gel DNA Ladder，展示典型的陽性與陰性樣本

(C)  文庫產(chǎn)量，對比陽性樣本與陰性對照產(chǎn)出結(jié)果