聚丙烯酰胺凝膠電泳優(yōu)點(diǎn)
①聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和N,N'甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝膠有 格子是帶有酰胺側(cè)鏈的碳-碳聚合物,沒(méi)有或很少帶有離子的側(cè)基,因而電滲作用比較小,不易和樣品相互作用。 ②由于聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成的物質(zhì),在聚合前可調(diào)節(jié)單體的濃度比,形成 不同程度交鏈結(jié)構(gòu),其空隙度可在一個(gè)較廣的范圍內(nèi)變化,可以根據(jù)要分離物質(zhì)分子 的大小,選擇合適的凝膠成分,使之既有適宜的空隙度,又有比較好的機(jī)械性質(zhì)。一 般說(shuō)來(lái),含丙烯酰胺7-7.5%的凝膠,機(jī)械性能適用于分離分子量范圍不1萬(wàn)至100萬(wàn)物 質(zhì),1萬(wàn)以下的蛋白質(zhì)則采用含丙烯酰胺15-30%的凝膠,而分子量特別大的可采用含 丙烯酰胺4%的凝膠,大孔膠易碎,小孔膠則難從管中取出,因此當(dāng)丙烯酰胺的濃度增 加時(shí)可以減少雙含丙烯酰胺,以改進(jìn)凝膠的機(jī)械性能。 ③在一定濃度范圍聚丙烯酰胺對(duì)熱穩(wěn)定。凝膠無(wú)色透明,易觀察,可用檢測(cè)儀直接測(cè)定。 ④丙烯酰胺是比較純的化合物,可以精制,減少污染。合成聚丙烯酰胺凝膠的原料是丙烯酰胺和甲撐雙丙烯酰胺。丙烯酰胺稱(chēng)單體,甲撐雙 丙烯酰胺稱(chēng)交聯(lián)劑,在水溶液中,單體和交聯(lián)劑通過(guò)自由基引發(fā)的聚合反應(yīng)形成凝 膠。
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