各種感受態(tài)細(xì)胞的區(qū)別、用途和特征
摘要: 本文主要介紹了各種感受態(tài)細(xì)胞的區(qū)別、用途和特征.
Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+). 特點(diǎn): 具有卡那抗性、四環(huán)素抗性和氯霉素抗性. 用途: 分子克隆和 質(zhì)粒 提取.
BL21(DE3)菌株 基因型: F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5). 特點(diǎn): 該菌株用于以T7 RNA聚合酶 為表達(dá)系統(tǒng)的高效外源基因的 蛋白 表達(dá)宿主.T7噬菌體RNA聚合酶基因的表達(dá)受控于λ噬菌體DE3區(qū)的lacUV5 啟動子 ,該區(qū)整合于BL21的染色體上.該菌適合于非毒性蛋白的表達(dá). 用途: 蛋白質(zhì) 表達(dá).
BL21(DE3)ply菌株 基因型: F- ompT gal dcm lon hsdSB(rB- mB-) λ(DE3) pLysS(cmR). 特點(diǎn): 該菌株帶有pLysS,具有氯霉素抗性.此質(zhì)粒還有表達(dá)T7溶菌酶的基因,T7溶菌酶能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平,但不干擾IPTG誘導(dǎo)的表達(dá). 適合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表達(dá). 用途: 蛋白質(zhì)表達(dá).
DH5α菌株 基因型: F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rK-, λ-). 特點(diǎn): 一種常用于質(zhì)粒克隆的菌株. 其Φ80dlacZΔM15基因的表達(dá)產(chǎn)物與pUC載體編碼的β-半乳糖苷酶氨基端實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ),可用于藍(lán)白斑篩選.recA1和 endA1的 突變 有利于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取. 用途: 分子克隆、質(zhì)粒提取和蛋白質(zhì)表達(dá).
JM109菌株 基因型: endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ Δ(lac-proAB) e14- [F' traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15]hsdR17(rK-mK+). 特點(diǎn): 部分抗性缺陷,適合重復(fù) 基因表達(dá) , 可用于M13克隆序列測定和藍(lán)白斑篩選. 用途: 分子克隆、質(zhì)粒提取和蛋白質(zhì)表達(dá). 相關(guān)閱讀: 質(zhì)粒DNA的超速離心分離 質(zhì)粒DNA分離方法比較(以E.Coli為例) 蛋白質(zhì)電泳相關(guān)試劑、緩沖液的配制方法 忘記 抗生素 ,嘗試 納米粒子 替代