RT實驗Olig（dT）15引物合成的條帶明顯優(yōu)于隨機引物，不是隨機引物的效果較好嗎？怎樣解釋這種現(xiàn)象

網(wǎng)友一回答：

Olig（dT）適合于長鏈甚至全長mRNA的RT，要求RNA必須有Poly A，所以真核生物的mRNA都適用，對RNA樣品的質(zhì)量要求較高，最好不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。 隨機引物 適合各種RNA的RT，尤其適合短鏈mRNA和模板豐度很低的情況（比如某個gene表達量很低）。一般建議每5μg總RNA的隨機引物的用量為50ng，如果每5μg總RNA的隨機引物的用量超過250ng，可能會導(dǎo)致小片段產(chǎn)物（＜500bp）的增加和長片斷、全長產(chǎn)物的降低。 總的來說，二者各有利弊。最好做預(yù)實驗時就試驗一次，選擇最佳的引物。

網(wǎng)友二回答

Olig（dT）適合于長鏈甚至全長mRNA的RT，要求RNA必須有Poly A，所以真核生物的mRNA都適用，對RNA樣品的質(zhì)量要求較高，最好不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。 隨機引物 適合各種RNA的RT，尤其適合短鏈mRNA和模板豐度很低的情況（比如某個gene表達量很低）。一般建議每5μg總RNA的隨機引物的用量為50ng，如果每5μg總RNA的隨機引物的用量超過250ng，可能會導(dǎo)致小片段產(chǎn)物（＜500bp）的增加和長片斷、全長產(chǎn)物的降低。 總的來說，二者各有利弊。最好做預(yù)實驗時就試驗一次，選擇最佳的引物。